链霉亲和素富集和新

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alamin447
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Joined: Sun Jul 23, 2023 12:45 pm

链霉亲和素富集和新

Post by alamin447 » Sun Jul 23, 2023 12:54 pm

捕获 CRISPR-Cas 诱导的 DSB 处的从头 LINE-1 逆转录转座子插入来检测脱靶;PEAC-seq(Prime Editor 辅助脱靶表征)以及类似技术 TAPE-seq(Prime Editor 测序的TAgmentation)通过采用带有 Cas9 核酸酶和序列的 Prime 编辑器来标记在靶和脱靶。优化的含有标签的 pegRNA;DISCOVER-Seq(发现原位 Cas 脱靶并通过测序验证)追踪 DSB 中 MRE11 的

精确招募;和 BLESS(直接原位断裂标记、一代测序),以及其改进国家电子邮件列表版本 BLISS(原NAPtag 融合] 或 CRISPR-Cas [ 106 , 107 ] 和嵌合 ADAR 蛋白(例如 SNAP-ADAR)被携带至目标编辑位点,使用 gRNA 进行编辑。LEAPER 和 CLUSTER 都可以招募内源 ADAR 进行靶向编辑,但它们的
Image
gRNA 不同。LEAPER 的 gRNA 是 ADAR 招募 NA 是簇引导 RNA (CLUSTER gRNA) [ 110 ]。Stafforst 的团队还测试了反碱基对编辑产量的影响,发现 U 和 C 给出了定量产量,但用腺苷作为反碱基进行编辑效率较低,而用鸟苷作为反碱基进行编辑则受到严重阻碍 [102 ]]。总体情况是,AG错配的应用减少了脱靶编辑事件,AC错配的应用提高了目标编辑效率。在肿瘤中,应用AG 错配来



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